Съдържание:

Как да вмъкнете ген в плазмид?
Как да вмъкнете ген в плазмид?

Видео: Как да вмъкнете ген в плазмид?

Видео: Как да вмъкнете ген в плазмид?
Видео: Свойства плазмид и их использование в генетическом клонировании. 11 класс. 2024, Ноември
Anonim

Основните стъпки са:

  1. Разрежете плазмид и "поставете" в ген . Този процес разчита на рестрикционни ензими (които разрязват ДНК) и ДНК лигаза (която свързва ДНК).
  2. Вмъкване на плазмид в бактерии.
  3. Пораснете много плазмид -носещи бактерии и ги използват като "фабрики" за производство на протеина.

Също така, как може да се вмъкне ген в плазмид GCSE?

то е вмъкнат в плазмид с помощта на лигазни ензими. на плазмид отива в бактериална клетка. трансгенната бактерия се възпроизвежда, в резултат на което в милиони идентични бактерии, които произвеждат човешки инсулин.

Освен това, как да субклонирате ген? Основни стъпки за Субклониране Вие освобождавате и пречиствате вашата инсерция от родителския вектор, лигирате тази вложка в подготвен дестинационен вектор, трансформирате тази реакция на лигиране в компетентни бактериални клетки. След това преглеждате трансформираните клетки за вложката.

Като се има предвид това, кои са 4-те стъпки на генното клониране?

В класическите протоколи за смилане на рестрикционни ензими и клониране с лигиране, клонирането на всеки ДНК фрагмент по същество включва четири стъпки:

  • изолиране на ДНК от интерес (или целева ДНК),
  • лигиране,
  • трансфекция (или трансформация) и.
  • процедура за скрининг/подбор.

Как амплифицирате плазмид?

Експериментална процедура

  1. Пуснете PCR и пречистете PCR продукта: Изпълнете PCR, за да амплифицирате вашата вмъкната ДНК.
  2. Смилайте вашата ДНК:
  3. Изолирайте вашата вложка и вектор чрез пречистване с гел:
  4. Лигирайте вмъкването във вашия вектор:
  5. Трансформация:
  6. Изолирайте готовия плазмид:
  7. Проверете своя плазмид чрез секвениране:

Препоръчано: